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糖尿病肾病早期诊断依据

糖尿病肾病早期诊断依据

三、尿白蛋白片段的检测

(一)方法免疫印迹法。

(二)实验步骤

1、尿样与样品处理液等量混合,置沸水浴3分钟。2、聚丙烯酰胺凝胶电泳,每孔加样20μι,电压200v。3、将胶上的蛋白带转印到硝基纤维素膜上,转印电流340ma,2小时后取出,封闭1小时。4、加入白蛋白抗体和酶标白蛋白,冰箱过夜。5、加入显色液,出现蛋白带为阳性,未见蛋白带为阴性。

(三)结论

通过实验得出凡是尿白蛋白阳性者,尿白蛋白片段也为阳性,而尿白蛋白阴性者中,仍有30%为尿白蛋白片段阳性。曾有人对后者进行随访观察,发现他们中有18%发展为尿白蛋白,蛋白阳性。因此,认为尿白蛋白片段具有更高的特异性和早期栓出率,能更早地发现dn患者。

综上所述,除尿微量白蛋白检测是目前人们较为公认的dn早期诊断指标外,其它两种都还在观察及研究中。目前国内外还没有建立尿铜蓝蛋白酶联免疫测定方法,市场上买不到试剂盒,其作用机理还待于进一步深入研究。免疫印迹法分析尿白蛋白片段,在我院已应用于临床,对尿白蛋白阴性者,再用本法检测分析,可以更有效地避免早期糖尿病肾病的漏诊,是预测肾脏病变的更为早期,更为灵敏的指标。

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