杜克雷嗜血杆菌的培养不仅有助于诊断，而且可确定分离的细菌对抗生素的敏感性，目前已分离出耐抗生素的杜克雷嗜血杆菌。
二、血清学诊断软下疳
感染杆克雷嗜血杆菌能产生抗体，通过血清学检查，不论是补体结合，凝集反应以及荧光抗体间接法等均可证实，但尚未推广，目前认为igm抗体敏感性为74%，igg抗体敏感性为94%，其特异性分别为84%和64%。
软下疳的诊断
根据发病前的性接触史，尤其是不洁性生活史，典型的临床表现和经过，较短的潜伏期后发生软而扁的丘疹、脓疱、溃疡，单侧性的化脓性淋巴结炎，直接镜检和培养检出杜克雷嗜血杆菌，p
cr检测杜克雷嗜血杆菌dna，即可作出诊断。诊断依据barber氏对本病诊断作如下建议，并作为诊断标准①阴部溃疡，一个或多个。②暗视野显微镜检查，梅毒螺旋体阴性。③梅毒血清试验阴性。④病损潜行性边缘取材涂片，用瑞氏染色未发现朵诺凡小体（肉芽肿荚膜杆菌），而用革兰氏染色可找到短小的革兰氏阴性杆菌。
