运用精子制备技术降低dna损伤精子的比率,可能是提高art受精率的一个重要途径,但方法应轻柔、快速,尽量减少体外处理的时间和步骤,降低离心速度。释与洗涤技术、洗涤上游技术、percoll密度法、puresperm法和玻璃棉过滤法已被广泛运用。在液化前进行冲洗能抑制细菌和碎片复合物附着精子表面,接着减少由ros造成的精子dna损伤,提高受精比率。经过精子洗涤上游技术、percoll密度法、puresperm法和玻璃棉过滤法处理后,精液样本中精子dna的完整性均能得到显著提高。
目前,主要采用以液氮为储存剂、逐步降温于超低温状态下保存的方法,会显著增加冻融复苏后不育患者精子dna的损伤程度。donnelly等实验表明,percoll密度法离心后,在精子中加入精浆一起冷冻保存,与未加精浆精子相比,精子dna完整性显著提高,等同于新鲜处理后的精子。复苏后再进行第2次percoll处理,精子dna完整性则不再提高。这可能是因为精浆中存在丰富的抗氧化物质,它的加入可保护精子免受冻融损伤。因此,在制备的精子中加入精浆冷冻保存,复苏后不再进行第2次精子处理可能是较好的精子冷冻保存方案。
抗氧化物能保护精子dna免受ros损伤,体外培养加入抗坏血酸(600μmol/l)、a-生育酚(30μmol/l和60μmol/l)和尿酸(400μmol/l)时,均已被证实能在x线损伤精子dna时起到保护作用。因此体外培养时单独独加入这些抗氧化物能有利于保护精子dna的完整性。植物复合物异黄酮(染料木黄酮和牛尿酚)具有抗氧化的作用,生理学浓度加入时,染料木黄酮效力最强,其次依次为牛尿酚、抗坏血酸和a-生育酚,其中当染料木黄酮和牛尿酚联合加入时效力比单独应用更强。
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