2、雌激素试验孕激素试验阴性，则应作雌激素试验。口服乙烯雌酚1mg/日，共20日，或倍美力（premarin）0.625mg/日是，共20日。停药后有子宫出血，属ii度闭经，提示下丘脑――垂体――卵巢轴功能障碍，致雌激素水平低下。如无子宫出血，则提示子宫性闭经。
3、gnrh兴奋试验将gnrh（10肽）50ug溶于生理盐水50ml内，静脉推注。注前及注后25、45、90、180分钟采血2ml，放射免疫测定lh、fsh值。
试验结果①正常反应，lh值上升比基值升高3倍，高峰出现在注后15-30分钟。②活跃反应，lh值上升超过基值4位以上。③延迟反应，高峰出现在注药后60-90分钟。④无反应或低弱反应，注gnrh后lh值没有变动，或lh值上升未达基值2倍。
临床意义①下丘脑功能不全，fsh、lh基值低，gnrh兴奋试验呈正常反应。②垂体功能不全，fsh、lh基低，gnrh兴奋试验呈无反应或低弱反应，见于手术或放射破坏垂体组织和席汉综合征。③卵巢功能不全，fsh、lh基值高，gnrh兴奋试验呈活跃反应。④多囊卵巢综合征，fsh基值正常或偏低，lh基值则较高，gnrh兴奋试验lh呈活跃反应，而fsh呈正常反应．
