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5大检查让尖锐湿疣现形

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(1)实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本dna外的其它各种pcr反应试剂。

(2)各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。

(3)加入80-100μl石蜡油,在台式离心机上快速离心数秒钟,使各反应试剂收集于油层下。目前,pcr试剂已商品化,反应体积为25μl。使用时只加入标本dna即可。

(4)将反应管置pcr扩增仪上,循环参数为95℃30s,55℃40s,72℃50s循环35次,最后72℃延伸5min。

4.每次试验应设阳性及阴性对照。以载有hpv的重组质粒(每反应为100pg)或含有hpv的细胞系(如caski、hela)dna为阳性对照,以无hpv的人细胞系dna为阴性对照。

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