（2）标本处理
①预处理所有液体标本均可直接进行模板制备。可以取100μl标本液，离心5000r/min×。5min后，去上清，取沉淀物进行模板制备。
②模板制备a蛋白酶k消化裂解法沉淀物加100μl蛋白酶k消化裂解液，55℃1h后，煮沸10min，离心5000r/min×。5min，收集上清。b水煮法沉淀物加100μl蒸馏水，摇均水煮20min，离心5000r/min×。5min收集上清。c1%tritonx-100裂解法取采集的标本液100μl，加入1μltritonx-100，水煮20min，5000r/min×。5min，收集上清。d5%np-40裂解法取采集的标本液100μl，加5μlnp-40，水煮20min，5000r/min×。5min收集上清。e如标本溶血严重经上述裂解处理后，再加等体积酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀dna，加10μldw溶解待检。
2、pcr扩增
（1）引物设计。以hsvdna聚合酶的高保守区为检测靶序列以确保特异性。设计3个引物，一个上游共同性引物，dnap5（5′atggtgaaaacatcgacatgtacgg3′）二个下游特异性引物，dnap3-1（5′cctcgcgttcgtcctcgtcctcc3′）和dnap3-2（5′cctccttgtcgaggccccgaaac3′），可以分别扩增出hsv-1469bpdna片段（1981～2359）、hsv-2391bp片段（1561～1953）从二型pcr扩增产物中设计了一个不分型的特异性探针hsvp35ggcgtagtaggcggggatgtcgcg3‘）。
